实验结果报告：1.抗FB1单克隆抗体的鉴定
1.1单克隆抗体亚型的鉴定
抗FB1单克隆抗体经小鼠抗体分型试纸条测定，表明抗FB1单克隆抗体为IgG1，κ型。

1.2杂交瘤细胞分泌抗体的稳定性
将杂交瘤细胞8A6经连续5代培养、冻存后复苏培养，待培养的细胞长至培养瓶底70-80%时，分别取每批培养液采用间接ELISA测定抗体效价，细胞培养液的效价均为1:1600-1:3200，不同代次、复苏培养的杂交瘤细胞8A6分泌的抗体水平未见有明显变化，说明该杂交瘤细胞分泌抗体的能力稳定。细胞复苏过程中生长缓慢，复苏15天才能长至70-80%
1.3腹水中抗体效价的测定
采用间接竞争ELISA检测小鼠腹水的效价，腹水中抗体效价为1280000。

1. 制备获得的抗ZEN单抗腹水测定其效价，得抗ZEN单克隆抗体7G5的效价为1:6×10⁵，蛋白质含量为10 mg/mL，抗体经辛酸-硫酸铵沉淀法纯化。

2. 抗OTA单克隆抗体的生产和纯化

杂交瘤细胞接种BALB/c小鼠体内生产单抗，收获的腹水进行间接ELISA测定，以同比例稀释的阴性血清吸光值的2倍时的稀释度作为效价，单克隆抗体7G1

的效价为1:5×10⁵。抗体经辛酸-硫酸铵沉淀法纯化后，测得纯化的抗体效价1:5×10⁵

 具体请见下附文件

四、项目后期具体工作计划

2021.1-2021.3

研究计划： OTA、FB₁、F-2的模拟抗原的融合表达载体构建；

2021.4-2021.6

研究计划： OTA、FB₁、F-2的模拟抗原纯化及活性测定。

2021.7-2021.9

研究计划：优化量子点荧光免疫层析试纸条的影响因素（缓冲体系、模拟抗原）；

2021.10-2021.12

研究计划：优化量子点荧光免疫层析试纸条的影响因素（缓抗体浓度、标记条件等）；试纸条的组装；

2022.1-2022.3

研究计划：确定试纸条的特异性、准确性、灵敏度、稳定性；

2022.4-2022.6

研究计划：样品检测及确证实验（HPLC、LC-MS）。

同意通过